Transfert technologique d'édition génétique à la Faculté d'Ingénierie et de Technologies Appliquées

Nous avons le plaisir de vous informer qu'entre le 01.09.2024 et le 31.10.2024, Drd. Ing. Huiban Florin Adrian (coordinateurs de doctorat Prof. Dr. Tulcan Camelia et Prof. Dr. Camen Dorin Dumitru) effectue un stage de perfectionnement à l'Université de Novi Sad, Institut de Sylviculture et de l'Environnement des Zones Basses, dans le cadre du programme Erasmus +, pour le transfert technologique d'édition génétique à l'Université des Sciences de la Vie ’’Regele Mihai I’’ de Timișoara – Faculté d'Ingénierie et de Technologies Appliquées, spécialisation Ingénierie Génétique.

CRISPR (Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats) est une technologie d'édition génétique révolutionnaire, qui permet d'éditer l'ADN de manière précise, rapide et efficace.

Ce projet d'édition génétique consiste en plusieurs étapes :

Identification des gènes favorisant les pathogènes : cette étape implique la sélection de gènes candidats à partir d'espèces de peupliers et d'autres plantes, les homologues de ces gènes devant être identifiés dans le génome des espèces Populus trichocarpa et Populus alba, en utilisant la base de données NCBI Plants. Les gènes transporteurs de sucre ou de soufre, potentiellement responsables du soutien des agents pathogènes, ont été choisis.

Cibles précises pour l'édition génétique : pour faciliter l'édition génétique, des cibles CRISPR sont conçues agissant au niveau du premier exon des gènes sélectionnés, ainsi que des amorces PCR pour l'amplification et le séquençage. Il est assuré que les régions cibles se chevauchent avec les sites de digestion des enzymes de restriction, là où cela est possible, garantissant une plus grande précision dans le processus de mutagenèse.

Construction des vecteurs de transformation : les cibles CRISPR sont insérées et préparées pour être utilisées dans l'expérience. Après amplification des produits PCR, les séquences sont vérifiées pour confirmer la présence des cibles et valider le système de dépistage des mutations. Cette étape est cruciale pour s'assurer que le processus d'édition fonctionne correctement, avant de passer à la transformation proprement dite.

Transformation génétique « in vitro » : avec les vecteurs préparés, les peupliers sont transformés dans des conditions « in vitro », en utilisant le complexe CRISPR pour introduire les modifications génétiques souhaitées.

Dépistage des mutations : test de l'endonuclease T7 : un test de dépistage des mutations est effectué en utilisant la méthode de l'endonuclease T7, un outil de diagnostic qui détecte et valide la présence de modifications génétiques. Cette technique est essentielle pour déterminer le succès et la précision des mutations introduites, fournissant une image claire des résultats.

Grâce à ce programme, le doctorant Huiban Florin Adrian a la possibilité d'élargir ses connaissances sur les technologies de pointe dans le domaine de l'édition génomique. Ce projet facilite l'échange de connaissances et d'idées innovantes, ainsi que l'ouverture de nouvelles collaborations de recherche à long terme.